O objetivo da presente pesquisa foi avaliar a citotoxicidade de sistemas adesivos autocondicionantes sobre células de linhagem odontoblástica MDPC-23. Para o experimento, 30.000 células/cm2 foram semeadas em compartimentos contendo meio de cultura (DMEM) completo e mantidas em cultura por 72 horas. Extratos dos adesivos dentináriosAdper Prompt, Xeno III,AdheSE, Clearfil SE Bond (CSEB) e Clearfil Protect Bond (CPB) foram obtidos aplicando-se 5μL de cada sistema sobre discos de papel filtro. Após fotoativação por 10s, os discos foram imersos emDMEMpor 24h. Tampão fosfato (TF) foi aplicado como grupo controle. Para a avaliação dos efeitos citotóxicos, o meio de cultura em contato com as células por 72 horas foi substituído pelos extratos experimentais e controle e mantidos em contato com as células por 4h. Aviabilidade celular foi mensurada pelo teste de MTT e a morfologia celular avaliada em MEV. Também o pH dos extratos foi determinado em um pHmetro digital. Em ordem decrescente, a redução do metabolismo celular causada pelo Adper Prompt, CPB, CSEB, Xeno III, e AdheSE foi de 92,45%, 86,39%, 80,22%, 14,69% e 10,11%, respectivamente, sendo que ausência de correlação entre citotoxicidade e pH foi observada. Exceto para o Xeno III e AdheSE, os demais agentes adesivos apresentaram redução do metabolismo celular estatisticamente significante (Testes Mann-Whitney e Kruskall-Wallis) quando comparado ao grupo controle (TF). Os adesivos autocondicionantes investigados apresentaram efeito citotóxico de variada intensidade, provavelmente modulado pelas diferençasemsuas composições químicas e solubilidadeemmeio aquoso.